咨询热线
0632-5559090
ARTICLE/ 技术文章
首页  >  技术文章  >  蜂王浆中10-羟基-2-葵烯酸液相色谱分析

蜂王浆中10-羟基-2-葵烯酸液相色谱分析

发布时间:2011-07-12浏览:1696次

                蜂王浆中10-羟基-2-葵烯酸液相色谱分析

10-羟基-2-葵烯酸是科学家从蜂王浆中分离出一种有机酸,其分子式为C10H18O3,称为10-羟基-2-癸烯酸(简称HAD),是蜂王浆的重要成分之一,是一种特殊的不饱和有机酸,由于这种酸在自然界的其它物质中没有,只存在于蜂王浆中,所以也称为王浆酸。10-羟基-2-癸烯酸含量是蜂王浆质量的重要指标之一,一般含量在1.4%~4%之间,约占总脂肪酸的50%以上。分离出的纯王浆酸呈白色晶体,在新鲜的蜂王浆中多以游离形式存在,性质比较稳定,有很好的杀菌、抑菌作用和抗癌、抗放射的功能。10-羟基-2-癸烯酸大大提高了蜂王浆的保健和医疗的效用。
一、试剂
1.本实验所用水为重蒸馏水;
2.甲醇:分析醇
3.乙醇:优级纯
4.内标物:对羟基苯甲酸甲酯含量99.0%;
5.10-HAD标准品:99.0%以上。使用前应在放有浓硫酸的减压干燥器内减压干燥24h;
6.10-HAD标准溶液:取干燥后的10-HAD标准品约25mg,精密称定,加无水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。此溶液每毫升含内标物约0.65mg。
7.盐酸(C=0.03mol/L):量取0.1mol/L盐酸100ml,加入200ml重蒸馏水中。
8.流动相:甲醇55%+0.03mol/L盐酸10%+水35%
二、仪器配置:
LC-3000液相色谱仪:配紫外检测器,泵头带冲洗功能;
色谱处理工作软件:能通过电脑键盘输入LC-3000液相色谱仪所有参数,并能对柱温箱参数设定;
色谱柱:C18,250*4.6*10 或250*4.6*5
柱温箱;
离心机:不低于3000r/min,50ml
超声波清洗机;
漩涡混合器;
分析天平:精度0.0001g
三、样品处理
样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀,取约0.5g,置于已称定的50ml容量瓶中,精密称定,加0.03mol/L盐酸1ml和水2ml,置漩涡混合器上混合使样品溶解,加无水乙醇30ml,边加边轻轻摇动,再精密加入内标溶液10ml,并用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,立即置超声波中超声15min,或置漩涡混合器上振荡15min,取出,在3000r/min下离心10min后测定。如不能及时测定,应放置在冰箱中冷藏待测。
四、色谱条件
测定波长:210nm;柱温:35度;流动相流速:1ml/min。
五、校正因子测定
精密吸取10-HAD标准溶液0.5、1、2、3、4、5ml至10ml容量瓶中。精密加入内标溶液2ml,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。分别吸取此溶液2ul,注入色谱仪,用峰面积比值计算,应呈线性,求出校正因子F。
:平行试验相对偏差不得超过2.0%
六、样品测定
吸取样品溶液4ul,注入色谱仪,按“内标法”定量。
七、计算
蜂王浆中10-羟基-2-葵烯酸含量按式中计算:
 
式中:
                  Ai   Ms
X2=F×----×----×100
                    As   Mi
 
X2---蜂王浆中10-羟基-2-葵烯酸含量%
F----校正因子
Ai---样品中被测组分峰面积
As—试样中内标物峰面积
Ms—内标物质量,单位为克(g)
Mi—样品质量,单位为克(g)
 
 
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站